In situ monitoring of PTHLH secretion in neuroblastoma cells cultured onto nanoporous membranes
De La Escosura-Muñiz, Alfredo (Institut Català de Nanociència i Nanotecnologia)
Espinoza Castañeda, Marisol (Institut Català de Nanociència i Nanotecnologia)
Chamorro García, Alejandro (Institut Català de Nanociència i Nanotecnologia)
Rodríguez-Hernández, Carlos J. (Hospital Sant Joan de Déu (Manresa))
De Torres, Carmen (Hospital Sant Joan de Déu (Manresa))
Merkoçi, Arben (Institut Català de Nanociència i Nanotecnologia)

Data:	2018
Resum:	In this work, we propose for the first time the use of anodic aluminum oxide (AAO) nanoporous membranes for in situ monitoring of parathyroid hormone-like hormone (PTHLH) secretion in cultured human cells. The biosensing system is based on the nanochannels blockage upon immunocomplex formation, which is electrically monitored through the voltammetric oxidation of Prussian blue nanoparticles (PBNPs). Models evaluated include a neuroblastoma cell line (SK-N-AS) and immortalized keratinocytes (HaCaT) as a control of high PTHLH production. The effect of total number of seeded cells and incubation time on the secreted PTHLH levels is assessed, finding that secreted PTHLH levels range from approximately 60 to 400 ng/mL. Moreover, our methodology is also applied to analyse PTHLH production following PTHLH gene knockdown upon transient cell transfection with a specific silencing RNA (siRNA). Given that inhibition of PTHLH secretion reduces cell proliferation, survival and invasiveness in a number of tumors, our system provides a powerful tool for the preclinical evaluation of therapies that regulate PTHLH production. This nanoporous membrane - based sensing technology might be useful to monitor the active secretion of other proteins as well, thus contributing to characterize their regulation and function.
Ajuts:	European Commission 675228 Ministerio de Economía y Competitividad PCIN-2016-066 Ministerio de Economía y Competitividad MAT2014-52485-P Ministerio de Economía y Competitividad SEV-2013-0295 Ministerio de Economía y Competitividad MSCBS/FIS PI17/01822 Ministerio de Economía y Competitividad MSCBS/FIS PI14/00040 Agència de Gestió d'Ajuts Universitaris i de Recerca 2014/SGR-260
Drets:	Aquest document està subjecte a una llicència d'ús Creative Commons. Es permet la reproducció total o parcial, la distribució, i la comunicació pública de l'obra, sempre que no sigui amb finalitats comercials, i sempre que es reconegui l'autoria de l'obra original. No es permet la creació d'obres derivades.
Llengua:	Anglès
Document:	Article ; recerca ; Versió acceptada per publicar
Matèria:	Nanopores/nanochannels ; PTHLH ; Neuroblastoma ; Cancer cells ; Electrochemical detection
Publicat a:	Biosensors & bioelectronics, Vol. 107 (June 2018) , p. 62-68, ISSN 1873-4235

DOI: 10.1016/j.bios.2018.01.064

Postprint 23 p, 991.6 KB

El registre apareix a les col·leccions:
Documents de recerca > Documents dels grups de recerca de la UAB > Centres i grups de recerca (producció científica) > Ciències > Institut Català de Nanociència i Nanotecnologia (ICN2)
Articles > Articles de recerca
Articles > Articles publicats