Inactivation of the dimeric Rap anti-repressor of the conjugation operon is mediated by peptide-induced tetramerization
Crespo, Isidro (ALBA Laboratori de Llum de Sincrotró)
Bernardo, Nerea (ALBA Laboratori de Llum de Sincrotró)
Miguel Arribas, Andrés (Centro de Biología Molecular Severo Ochoa)
Singh, Praveen K. (Centro de Biología Molecular Severo Ochoa)
Luque-Ortega, Juan Román (Centro de Investigaciones Biológicas (Madrid))
Alfonso, Carlos (Centro de Investigaciones Biológicas (Madrid))
Malfois, Marc (ALBA Laboratori de Llum de Sincrotró)
Meijer, Wilfried J. J. (Centro de Biología Molecular Severo Ochoa)
Boer, Roeland (ALBA Laboratori de Llum de Sincrotró)

Fecha:	2020
Resumen:	Quorum sensing allows bacterial cells to communicate through the release of soluble signaling molecules into the surrounding medium. It plays a pivotal role in controlling bacterial conjugation in Gram-positive cells, a process that has tremendous impact on health. Intracellular regulatory proteins of the RRNPP family are common targets of these signaling molecules. The RRNPP family of gene regulators bind signaling molecules at their C-terminal domain (CTD), but have highly divergent functionalities at their N-terminal effector domains (NTD). This divergence is also reflected in the functional states of the proteins, and is highly interesting from an evolutionary perspective. Rap is an RRNPP encoded on the Bacillus subtilis plasmid pLS20. It relieves the gene repression effectuated by Rco in the absence of the mature pLS20 signaling peptide Phr*. We report here an in-depth structural study of apo and Phr*-bound states of Rap at various levels of atomic detail. We show that apo-Rap is dimeric and that Phr*-bound Rap forms NTD-mediated tetramers. In addition, we show that Rap binds Rco directly in the absence of Phr* and that addition of Phr* releases Rco from Rap. This allows Rco to bind the promotor region of crucial conjugation genes blocking their expression.
Ayudas:	Ministerio de Economía y Competitividad BFU2016-75471-C2-1-P Ministerio de Economía y Competitividad BIO2013-41489-P Ministerio de Economía y Competitividad BIO2016-77883-C2-2-P
Derechos:	Aquest document està subjecte a una llicència d'ús Creative Commons. Es permet la reproducció total o parcial, la distribució, la comunicació pública de l'obra i la creació d'obres derivades, fins i tot amb finalitats comercials, sempre i quan es reconegui l'autoria de l'obra original.
Lengua:	Anglès
Documento:	Article ; recerca ; Versió publicada
Publicado en:	Nucleic acids research, Vol. 48, issue 14 (Aug. 2020) , p. 8113-8127, ISSN 1362-4962

DOI: 10.1093/nar/gkaa540
PMID: 32658272

15 p, 7.0 MB

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