| Data: |
2025 |
| Resum: |
Aquesta tesi doctoral comprèn una sèrie d'estudis orientats al desenvolupament d'un producte basat en teràpia cel·lular amb cèl·lules mare mesenquimals canines (MSCs) al·logèniques per al tractament de l'artrosi canina. Aquest enfocament terapèutic representa una estratègia prometedora per al maneig de malalties articulars degeneratives com l'artrosi. Tanmateix, un dels principals reptes per a l'aplicació clínica de les MSCs al·logèniques en medicina veterinària és la preservació eficaç de la viabilitat i funcionalitat cel·lular durant l'interval entre el processament cel·lular i l'administració intraarticular. L'objectiu principal d'aquesta recerca és desenvolupar i validar un medi de conservació capaç de mantenir la viabilitat, el fenotip i la capacitat biofuncional de les MSCs derivades de teixit adipós caní durant l'emmagatzematge a curt termini (24-72 hores), en dues condicions de temperatura: refrigeració i temperatura ambient. A més de garantir l'estabilitat cel·lular, es pretén que aquest medi presenti propietats bioactives beneficioses per a l'entorn articular -com ara efectes antiinflamatoris o lubricants- que afavoreixin la integració cel·lular i l'eficàcia terapèutica posterior a la infiltració. La hipòtesi de treball és que un medi enriquit amb Lisat Plaquetari (PL) i/o Àcid Hialurònic (HA) pot mantenir una viabilitat cel·lular superior al 80 % durant les primeres 24-48 hores. A més, aquests medis contenen molècules bioactives que poden afavorir la funcionalitat cel·lular, contribuir a la homeòstasi articular i augmentar el seu potencial terapèutic. El treball es divideix en tres fases: (1) optimització del lisat plaquetari ric en factors de creixement per a l'ús com a component del medi; (2) selecció de medis de transport amb diferents formulacions suplementades (Ringer Lactat (RL), RL amb HA, RL amb PL i RL amb HA + PL), i avaluació in vitro de la viabilitat, morfologia i perfil immunofenotípic de les MSCs conservades; (3) una fase preclínica pilot en un model caní per validar la innocuïtat del producte i el seu potencial terapèutic inicial. Els resultats d'aquesta recerca suggereixen que els medis testats, com el RL suplementat, són adequats per a la conservació de MSCs durant 24 hores a temperatura ambient i fins a 48 hores en refrigeració. Això contribueix a establir un protocol estandarditzat per al transport i ús intraarticular de MSCs en la pràctica veterinària, facilitant-ne l'aplicació clínica segura i eficaç, i posant les bases per a un possible desenvolupament clínic o comercial futur. |
| Resum: |
Esta tesis es un trabajo que incluye diversos estudios orientados a desarrollar un producto basado en terapia celular con células madre mesenquimales caninas para el tratamiento de la osteoartritis canina. Esta terapia representa una estrategia prometedora en el tratamiento de enfermedades articulares degenerativas como la osteoartritis. Sin embargo, uno de los principales desafíos para su aplicación clínica en medicina veterinaria es la preservación eficaz de la viabilidad y funcionalidad celular durante el intervalo comprendido entre su procesamiento y la administración intraarticular. El objetivo principal de esta tesis doctoral es el desarrollo y validación de un medio de conservación que mantenga la viabilidad, el fenotipo y la capacidad biofuncional de células madre mesenquimales (MSCs) derivadas de tejido adiposo canino durante su almacenamiento a corto plazo (24-72 h) en dos rangos de temperatura: refrigeración y temperatura ambiente. Además de garantizar la estabilidad celular, se busca que dicho medio posea propiedades bioactivas beneficiosas para el entorno articular, como efectos antiinflamatorios o lubricantes, que favorezcan la integración y eficacia terapéutica tras la infiltración. La hipótesis de este estudio es que un medio enriquecido con lisado plaquetario y/o ácido hialurónico puede mantener una viabilidad celular superior al 80 % durante las primeras 24-48 horas. Asimismo, estos medios contienen componentes bioactivos que podrían favorecer la funcionalidad celular, contribuyendo a mantener la homeostasis articular y aumentando su potencial terapéutico. El trabajo se estructura en tres fases: (1) optimización del lisado plaquetario rico en factores de crecimiento para su uso como parte del medio; (2) selección de medios de transporte con distintas formulaciones suplementadas (Ringer Lactato (RL), RL suplementado con ácido hialurónico (HA), RL con lisado plaquetario (PL) y RL con HA + PL), y evaluación in vitro de la viabilidad, morfología y perfil inmunofenotípico de las MSCs conservadas; (3) realización de una fase preclínica piloto en modelo canino para validar la inocuidad del producto y su potencial terapéutico inicial. Los resultados de esta investigación sugieren que los medios testados, como el RL suplementado, son adecuados para la conservación celular durante 24 horas a temperatura ambiente y hasta 48 horas bajo refrigeración. Esto contribuye a establecer un protocolo estandarizado para el transporte y uso intraarticular de MSCs en la práctica veterinaria, facilitando su aplicación segura y eficaz en tratamientos celulares, y sentando las bases para su posible escalado clínico o comercial. |
| Resum: |
This doctoral thesis comprises a series of studies aimed at developing a product based on cell therapy using allogeneic canine mesenchymal stem cells (MSCs) for the treatment of canine osteoarthritis. This therapeutic approach represents a promising strategy for managing degenerative joint diseases such as osteoarthritis. However, one of the main challenges for the clinical application of allogeneic MSCs in veterinary medicine is the effective preservation of cell viability and functionality during the interval between cell processing and intra-articular administration. The primary objective of this research is to develop and validate a preservation medium capable of maintaining the viability, phenotype, and biofunctional capacity of MSCs derived from canine adipose tissue during short-term storage (24-72 hours) under two temperature conditions: refrigeration and room temperature. In addition to ensuring cellular stability, the medium is expected to provide bioactive properties that benefit the joint environment-such as anti-inflammatory or lubricating effects-that could enhance cellular integration and post-injection therapeutic efficacy. The working hypothesis is that a medium enriched with Platelet Lysate (PL) and/or Hyaluronic Acid (HA) can maintain cell viability above 80% during the first 24-48 hours. Moreover, these media contain bioactive molecules that may support MSC functionality, contribute to joint homeostasis, and increase their therapeutic potential. The study is structured in three phases: (1) optimisation of growth factor-rich platelet lysate for use as a medium component; (2) selection of transport media with various supplemented formulations (Lactated Ringer's (RL), RL with HA, RL with PL, and RL with both HA and PL), followed by in vitro evaluation of viability, morphology, and immunophenotypic profile of the preserved MSCs; (3) a pilot preclinical phase in a canine model to assess the clinical safety and initial therapeutic potential of the product. The results of this research suggest that supplemented media such as RL + PL or RL + HA are suitable for MSC preservation for up to 24 hours at room temperature and up to 48 hours under refrigeration. This contributes to the establishment of a standardised protocol for the transport and intra-articular use of MSCs in veterinary practice, supporting their safety in clinical applications and laying the groundwork for future clinical or commercial development. |
| Resum: |
Universitat Autònoma de Barcelona. Programa de Doctorat en Medicina i Sanitat Animals. |
| Drets: |
Aquest document està subjecte a una llicència d'ús Creative Commons. Es permet la reproducció total o parcial, la distribució, la comunicació pública de l'obra i la creació d'obres derivades, sempre que no sigui amb finalitats comercials, i sempre que es reconegui l'autoria de l'obra original.  |
| Llengua: |
Anglès |
| Col·lecció: |
Programa de Doctorat en Medicina i Sanitat Animals |
| Document: |
Tesi doctoral ; Text ; Versió publicada |
| Matèria: |
Osteoartritis ;
Osteoarthritis ;
Canina ;
Canine ;
Cèl·lules-mare ;
Stem-cells ;
Células-madre ;
Ciències de la Salut |
visitant ::
identificació
dir.
