A new approach to obtain pure and active proteins from Lactococcus lactis protein aggregates
Gifre-Renom, Laia (Institut de Recerca i Tecnologia Agroalimentàries)
Cano-Garrido, Olivia (Universitat Autònoma de Barcelona. Institut de Biotecnologia i de Biomedicina "Vicent Villar Palasí")
Fàbregas, F. (Institut de Recerca i Tecnologia Agroalimentàries)
Roca-Pinilla, R. (Institut de Recerca i Tecnologia Agroalimentàries)
Seras-Franzoso, Joaquin (Universitat Autònoma de Barcelona. Institut de Biotecnologia i de Biomedicina "Vicent Villar Palasí")
Ferrer-Miralles, Neus (Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Genètica i de Microbiologia)
Villaverde Corrales, Antonio (Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Genètica i de Microbiologia)
Bach, Àlex (Institució Catalana de Recerca i Estudis Avançats)
Devant, Maria (Institut de Recerca i Tecnologia Agroalimentàries)
Arís i Giralt, Anna (Institut de Recerca i Tecnologia Agroalimentàries)
Garcia-Fruitos, Elena (Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Genètica i de Microbiologia)

Fecha:	2018
Resumen:	The production of pure and soluble proteins is a complex, protein-dependent and time-consuming process, in particular for those prone-to-aggregate and/or difficult-to-purify. Although Escherichia coli is widely used for protein production, recombinant products must be co-purified through costly processes to remove lipopolysaccharide (LPS) and minimize adverse effects in the target organism. Interestingly, Lactococcus lactis, which does not contain LPS, could be a promising alternative for the production of relevant proteins. However, to date, there is no universal strategy to produce and purify any recombinant protein, being still a protein-specific process. In this context and considering that L. lactis is also able to form functional protein aggregates under overproduction conditions, we explored the use of these aggregates as an alternative source of soluble proteins. In this study, we developed a widely applicable and economically affordable protocol to extract functional proteins from these nanoclusters. For that, two model proteins were used: mammary serum amyloid A3 (M-SAA3) and metalloproteinase 9 (MMP-9), a difficult-to-purify and a prone-to-aggregate protein, respectively. The results show that it is possible to obtain highly pure, soluble, LPS-free and active recombinant proteins from L. lactis aggregates through a cost-effective and simple protocol with special relevance for difficult-to-purify or highly aggregated proteins.
Ayudas:	Ministerio de Economía y Competitividad RTA2015-00064-C02-01 Ministerio de Economía y Competitividad RTA2015-00064-C02-02
Derechos:	Aquest document està subjecte a una llicència d'ús Creative Commons. Es permet la reproducció total o parcial, la distribució, la comunicació pública de l'obra i la creació d'obres derivades, fins i tot amb finalitats comercials, sempre i quan es reconegui l'autoria de l'obra original.
Lengua:	Anglès
Documento:	Article ; recerca ; Versió publicada
Materia:	Bacterial Proteins ; Cost-Benefit Analysis ; Lactococcus lactis ; Protein Aggregates ; Recombinant Proteins
Publicado en:	Scientific reports, Vol. 8 (2018) , art. 13917, ISSN 2045-2322

DOI: 10.1038/s41598-018-32213-8
PMID: 30224788

10 p, 1.5 MB

El registro aparece en las colecciones:
Documentos de investigación > Documentos de los grupos de investigación de la UAB > Centros y grupos de investigación (producción científica) > Ciencias de la salud y biociencias > Instituto de Biotecnología y de Biomedicina (IBB)
Artículos > Artículos de investigación
Artículos > Artículos publicados