Functional Flow Cytometry to Predict PD-L1 Conformational Changes
Salvia, Roser (Institut Germans Trias i Pujol. Hospital Universitari Germans Trias i Pujol)
G. Rico, Laura (Institut Germans Trias i Pujol)
Ward, Michael D. (Thermo Fisher Scientific)
Bradford, Jolene A. (Thermo Fisher Scientific)
Petriz, Jordi (Institut Germans Trias i Pujol)
Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Biologia Cel·lular, de Fisiologia i d'Immunologia

Fecha:	2023
Resumen:	The programmed cell death protein 1/programmed cell death protein ligand 1 (PD-1/PD-L1) axis is one of the most widely recognized targets for cancer immunotherapy. Importantly, PD-L1 conformational changes can hinder target binding when living cells are used. Antibody affinity, equilibrium binding, association and dissociation rates, and other affinity-related constants are fundamental to ensure target saturation. Here, PD-L1 changes in conformation and their potential impact on PD-L1 function and mutation are explored. Specifically, we present detailed flow cytometry procedures to analyze PD-L1 reactivity in myeloid-derived suppressor cells (MDSCs). This approach can also be used to study the contribution of protein conformational changes in living cells. © 2023 Wiley Periodicals LLC. Basic Protocol 1: Sample preparation for PD-L1 myeloid-derived suppressor cells detection by flow cytometry. Basic Protocol 2: Protocol preparation, sample acquisition, and gating strategy for flow cytometric screening of PD-L1 myeloid-derived suppressor cells in patients with lung cancer. Support Protocol 1: Bioinformatic tools for the analysis of flow cytometric data.
Derechos:	Aquest material està protegit per drets d'autor i/o drets afins. Podeu utilitzar aquest material en funció del que permet la legislació de drets d'autor i drets afins d'aplicació al vostre cas. Per a d'altres usos heu d'obtenir permís del(s) titular(s) de drets.
Lengua:	Anglès
Documento:	Article ; recerca ; Versió acceptada per publicar
Materia:	PD-L1 ; Flow Cytometry ; Immunotherapy ; MDSC ; NSCLC
Publicado en:	Current Protocols, Vol. 3 Núm. 12 (december 2023) , p. e944, ISSN 2691-1299

DOI: 10.1002/cpz1.944

Postprint 24 p, 1.4 MB

El registro aparece en las colecciones:
Documentos de investigación > Documentos de los grupos de investigación de la UAB > Centros y grupos de investigación (producción científica) > Ciencias de la salud y biociencias > Institut d'Investigació en Ciencies de la Salut Germans Trias i Pujol (IGTP)
Artículos > Artículos de investigación
Artículos > Artículos publicados