Identification of specific effect of chloride on the spectral properties and structural stability of multiple extracellular glutamic acid mutants of bacteriorhodopsin
Lazarova, Tzvetana (Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Bioquímica i de Biologia Molecular)
Mlynarczyk, Krzysztof (University of Warsaw. Faculty of Chemistry)
Querol Murillo, Enrique (Universitat Autònoma de Barcelona. Institut de Biotecnologia i de Biomedicina "Vicent Villar Palasí")
Tenchov, Boris (Medical University (Sofia, Bulgària). Department of Medical Physics and Biophysics)
Filipek, Slawomir (University of Warsaw. Faculty of Chemistry)
Padrós, Esteve (Universitat Autònoma de Barcelona. Departament de Bioquímica i de Biologia Molecular)

Data:	2016
Resum:	In the present work we combine spectroscopic, DSC and computational approaches to examine the multiple extracellular Glu mutants E204Q/E194Q, E204Q/E194Q/E9Q and E204Q/E194Q/E9Q/E74Q of bacteriorhodopsin by varying solvent ionic strength and composition. Absorption spectroscopy data reveal that the absorption maxima of multiple EC Glu mutants can be tuned by the chloride concentration in the solution. Visible Circular dichroism spectra imply that the specific binding of Cl-can modulate weakened exciton chromophore coupling and reestablish wild type-like bilobe spectral features of the mutants. The DSC data display reappearance of the reversible thermal transition, higher T of denaturation and an increase in the enthalpy of unfolding of the mutants in 1 M KCl solutions. Molecular dynamics simulations indicate high affinity binding of Cl-to Arg82 and to Gln204 and Gln194 residues in the mutants. Analysis of the experimental data suggests that simultaneous elimination of the negatively charged side chain of Glu194 and Glu204 is the major cause for mutants' alterations. Specific Cl-binding efficiently coordinates distorted hydrogen bonding interactions of the EC region and reconstitutes the conformation and structure stability of mutated bR in WT-like fashion.
Ajuts:	Ministerio de Ciencia e Innovación BFU2012-40137-C02-01
Drets:	Aquest document està subjecte a una llicència d'ús Creative Commons. Es permet la reproducció total o parcial, la distribució, la comunicació pública de l'obra i la creació d'obres derivades, fins i tot amb finalitats comercials, sempre i quan es reconegui l'autoria de l'obra original.
Llengua:	Anglès
Document:	Article ; recerca ; Versió publicada
Matèria:	Chromophores ; Hydrogen bonding ; Molecular dynamics ; Membrane proteins ; Chlorides ; Excitons ; Monomers ; Absorption spectra
Publicat a:	PloS one, Vol. 11 issue 9 (2016) , art. e0162952, ISSN 1932-6203

DOI: 10.1371/journal.pone.0162952
PMID: 27657718

23 p, 2.8 MB

El registre apareix a les col·leccions:
Documents de recerca > Documents dels grups de recerca de la UAB > Centres i grups de recerca (producció científica) > Ciències de la salut i biociències > Institut de Biotecnologia i de Biomedicina (IBB)
Articles > Articles de recerca
Articles > Articles publicats