Web of Science: 15 cites, Scopus: 14 cites, Google Scholar: cites,
A bead-assisted flow cytometry method for the semi-quantitative analysis of Extracellular Vesicles
Suárez, Henar (Instituto de Investigación Sanitaria La Princesa)
Gámez-Valero, Ana (Institut Germans Trias i Pujol. Hospital Universitari Germans Trias i Pujol)
Reyes, Raquel (Centro de Biología Molecular Severo Ochoa)
López-Martín, Soraya (Instituto de Investigación Sanitaria La Princesa)
Rodríguez, María Josefa (Centro Nacional de Biotecnología-Consejo Superior de Investigaciones Científicas)
Carrascosa, José L. (Centro Nacional de Biotecnología-Consejo Superior de Investigaciones Científicas)
Cabañas, Carlos (Centro de Biología Molecular Severo Ochoa)
Borràs, Francesc E. (Institut Germans Trias i Pujol. Hospital Universitari Germans Trias i Pujol)
Yáñez-Mó, María (Instituto de Investigación Sanitaria La Princesa)
Universitat Autònoma de Barcelona

Data: 2017
Resum: Most experimental approaches commonly employed for the characterization and quantitation of EVs are time consuming, require of specialized instrumentation and often are rather inaccurate. To circumvent the caveats imposed by EV small size, we used general and specific membrane markers in bead assisted flow cytometry, to provide a semi-quantitative measure of EV content in a given sample. EVs were isolated from in vitro cultured cells-conditioned medium and biological fluids by size exclusion chromatography and coupled to latex beads to allow their detection by standard flow cytometers. Our analyses demonstrate a linear correlation between EV concentration and Mean Fluorescence Intensity values in samples cleared of protein contaminants. Comparison with one of the most widespread method such as NTA, suggests a similar linear range and reliable accuracy to detect saturation. However, although detection of the different biomarkers is feasible when tested on ultracentrifugationenriched samples, protein contamination impairs quantitation of this type of samples by bead-based flow cytometry. Thus, we provide evidence that bead-assisted flow cytometry method is an accurate and reliable method for the semiquantitative bulk analysis of EVs, which could be easily implemented in most laboratories.
Nota: Número d'acord de subvenció MINECO/BFU2014-55478-R
Nota: Número d'acord de subvenció ISCIII/PI13/00050
Nota: Número d'acord de subvenció AGAUR/2014SGR804
Nota: Número d'acord de subvenció FEDER/REDinREN/16/0009
Nota: Número d'acord de subvenció MINECO/BFU2014-54181-P
Nota: Número d'acord de subvenció MINECO/SAF2016-77096-R
Nota: Número d'acord de subvenció MICINN/RYC-2012-11025
Nota: Número d'acord de subvenció GENCAT/CES07/015
Nota: Altres ajuts: Fundación Ramón Areces; FPI-UAM i GEIVEX; La Marató de TV3 (482/U/2014)
Drets: Aquest document està subjecte a una llicència d'ús Creative Commons. Es permet la reproducció total o parcial, la distribució, la comunicació pública de l'obra i la creació d'obres derivades, fins i tot amb finalitats comercials, sempre i quan es reconegui l'autoria de l'obra original. Creative Commons
Llengua: Anglès.
Document: article ; recerca ; publishedVersion
Publicat a: Scientific reports, Vol. 7 (september 2017) , p. 1-11

DOI: 10.1038/s41598-017-11249-2
PMID: 28900146


11 p, 2.5 MB

El registre apareix a les col·leccions:
Documents de recerca > Documents dels grups de recerca de la UAB > Centres i grups de recerca (producció científica) > Ciències de la salut i biociències > Institut d'Investigació en Ciencies de la Salut Germans Trias i Pujol (IGTP)
Articles > Articles de recerca
Articles > Articles publicats

 Registre creat el 2018-10-24, darrera modificació el 2019-07-17



   Favorit i Compartir